炎癥性腸病(IBD)是一組慢性非特異性腸道炎癥性疾病，糞便鈣衛(wèi)蛋白（FC）在該病的管理中是較為理想的檢測(cè)標(biāo)志物。但FC的檢測(cè)結(jié)果易受多種因素影響，僅在取樣過程中就存在諸多變異因素，其應(yīng)用價(jià)值受到限制，因此如何規(guī)范FC的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是IBD診斷中重要的一環(huán)。
炎癥性腸病和糞便鈣衛(wèi)蛋白
近年來，炎癥性腸?。↖BD）在我國(guó)的發(fā)病率不斷升高，已經(jīng)成為消化科較為常見的疾病。
炎癥性腸病主要包括克羅恩?。–D）和潰瘍性結(jié)腸炎（UC）兩種類型，臨床上以腹痛、腹瀉為主要消化道表現(xiàn)，以發(fā)熱、消瘦、貧血為主要全身性表現(xiàn)。這些非特異性表現(xiàn)與腸道易激綜合征極易混淆，而FC的檢測(cè)卻能很好的把兩種病人區(qū)分開，醫(yī)學(xué)研究者能通過 糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行病情嚴(yán)重程度評(píng)估，從而減少不必要的腸鏡檢查。
鈣衛(wèi)蛋白是 S100 蛋白家族中的一種鈣鋅結(jié)合蛋白，其存在于中性粒細(xì)胞胞漿中，當(dāng)腸道炎癥通透性增加后會(huì)促進(jìn)中性粒細(xì)胞向腸腔遷移，導(dǎo)致 糞便鈣衛(wèi)蛋白水平增高。FC成分較為穩(wěn)定，有較好的耐熱性，不易被細(xì)菌和各種酶類破壞。
在歐洲，克羅恩病以及結(jié)腸炎組織( ECCO) 以及世界胃腸病組織( WGO) 的共識(shí)指南中，糞便鈣衛(wèi)蛋白被認(rèn)為是一種較為理想的 IBD 無創(chuàng)性標(biāo)志物。糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒對(duì)于IBD的診斷、活動(dòng)性評(píng)估及療效監(jiān)測(cè)具有較好的臨床價(jià)值，并具有試劑價(jià)廉、檢測(cè)無創(chuàng)、患者接受程度高和操作方便等多種優(yōu)點(diǎn)，對(duì)于減少非必需的腸鏡檢查，更好的提升患者體驗(yàn)具有重要的意義。
FC實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化操作指南
然而，糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)目前缺少有效的外部商用質(zhì)控品，患者年齡、用藥及標(biāo)本等因素也影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性，這為炎癥性腸病的鑒別帶來一定難度。FC檢測(cè)結(jié)果的有效性和可靠性與實(shí)驗(yàn)規(guī)范密不可分，我們除了規(guī)范取樣流程，其它因素如患者年齡、用藥、腸道準(zhǔn)備及血液影響等因素也應(yīng)當(dāng)規(guī)范化。
標(biāo)本影響因素及注意事項(xiàng)
標(biāo)本影響因素 | 注意事項(xiàng) | |
標(biāo)本留取 時(shí)間 | 同一患者同一天不同時(shí)間段所排出的糞便的FC含量之間也有較大差異，排便的次數(shù)與排便 間隔的長(zhǎng)短也會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響 | 清晨第 1 次排便的標(biāo)本推薦作為檢測(cè)樣本 |
標(biāo)本留取 方式 | 不規(guī)范的留樣卻很可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生較大影響 | 用規(guī)范的留樣杯，在留樣過程中保持樣品清潔，避免水分蒸發(fā)或混入水份 |
標(biāo)本采樣 及 萃取方式 | 糞便稱重采樣是采樣方式的“金標(biāo)準(zhǔn)"，目前主流的商業(yè)化檢測(cè)試劑盒大多采用定量萃取管對(duì)糞便進(jìn)行萃取，實(shí)際操作中糞便性狀多樣，單一萃取管萃取法，可能無法確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性 | 如對(duì)于固態(tài)便以及糊狀便，可用萃取管直接進(jìn)行采樣，而對(duì)于水樣便，則應(yīng)使用移液槍定量加樣。 |
不同的試劑盒所采用的定量萃取管的結(jié)構(gòu)、設(shè)計(jì)原理、精密度也不盡一致，使用不同萃取管也會(huì)造成 FC 結(jié)果變化。 | 使用與試劑盒同廠家的萃取系統(tǒng)，減少差異。對(duì)于非常異質(zhì)樣的樣本，建議使用涂布器或者類似的設(shè)備進(jìn)行手工均勻化 | |
標(biāo)本采樣 位置 | 在同一標(biāo)本的不同位置采樣，其 FC 檢測(cè)結(jié)果也會(huì)有較大差異。同一標(biāo)本不同位點(diǎn)的 FC 檢測(cè)值之間差異最大可達(dá) 23%。 | 采樣時(shí)建議避開血液和黏液部分，在樣本頭、體、尾至少 3 個(gè)不同位置均勻取樣 |
標(biāo)本存儲(chǔ) 的 時(shí)間和溫度 | FC 在室溫下的穩(wěn)定時(shí)間尚未有一致結(jié)論，最短是 1 d，最長(zhǎng)可以到 7 d。 | 對(duì) FC 檢測(cè)建議新鮮標(biāo)本盡快送檢 |
溫馨提示：考慮到糞便標(biāo)本的變異因素較多，各種條件對(duì)檢測(cè)水平產(chǎn)生的影響還難以確定，在實(shí)際科研中應(yīng)該進(jìn)行連續(xù)多次檢測(cè)，以確保結(jié)果的可靠性和有效性。
▲標(biāo)本影響因素及注意事項(xiàng)
德國(guó)DRG糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒
德國(guó)DRG出品的EIA-5415糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒，基于ELISA夾心法原理，可以用于定量檢測(cè)糞便樣品中的鈣衛(wèi)蛋白。該試劑盒建議與制樣系統(tǒng)EIA-5674配套應(yīng)用，以減少不同品牌萃取管差異引起的標(biāo)本取樣差異，更接近良好的實(shí)驗(yàn)效果。
科潤(rùn)達(dá)生物作為德國(guó)DRG的中國(guó)代理，能夠?yàn)楦鹘缬脩舴€(wěn)定供應(yīng)糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒，并提供科研代測(cè)，上門代測(cè)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)等服務(wù)。我們歡迎您致電，無論是親自下單還是咨詢技術(shù)問題，我們將真誠(chéng)為服務(wù)。
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